Extraction et utilisation des propriétés antimicrobiennes et anti oxydantes d’extraits aqueux et d’huile essentielle de plusieurs plantes aromatiques
Des informations générales:
Le niveau |
Doctorat |
Titre |
Extraction et utilisation des propriétés antimicrobiennes et anti oxydantes d’extraits aqueux et d’huile essentielle de plusieurs plantes aromatiques |
SPECIALITE |
Sciences agronomiques |
Page de garde:
Sommaire:
Chapitre I – Bio-agresseurs des cultures, des semences stockées et moyens de lutte
I-1- Facteurs d’altération
I-1-1- Maladies parasitaires et ravageurs (facteurs biotiques)
I-1-2- Agents phytopathogènes (microbiologiques)
a- Les bactéries phytopathogènes
b- Les champignons phytopathogènes
1-1-3- Agents biologiques: Les ravageurs sont des animaux
a) Les vertébrés:
b) Les arthropodes:
1-1-4- Méthodes de lutte <>
Chapitre II: Généralités sur la phytothérapie et le métabolisme secondaire des plantes
I- 2 -1- Le pouvoir des plantes
I-2-2- Domaines d’application des plantes médicinales
I-2-2- Définition de la phytothérapie 14
I-2-3- Intérêts des métabolites secondaires des plantes thérapeutiques .14
I-2-4- Nature chimique des métabolites secondaires des plantes thérapeutiques .14
I-2-4-1- Les composés phénoliques : 14
a- Rôles pour la plante 14
b- Utilisations par l’Homme 14
I-2-4-2- Les alcaloïdes 16
a- Rôles pour la plante 16
b- Utilisations par l’Homme: 16
I-2-4-3- Les terpénoïdes: .16
a- Rôles pour la plante 16
b- Utilisations par l’Homme: 16
I-2-5- Les huiles essentielles 17
– Description 18
– Répartition systématique et caractères chimiques 18
I-2-6- L’activité antioxydante 19
I-2-6-1- Les antioxydants 19
a) Les antioxydants primaires 20
b) Les antioxydants secondaires 21
I-2-6-2- Balance Oxydants /Antioxydants et stress oxydant .22
I-2-6-3- Méthode d’analyse de l’Activité antioxydante des extraits végétaux 22
Chapitre III :
Méthodes d’extraction des extraits végétaux
I-3-1- Méthodes d’extraction des extraits végétaux 24
I-3-1-1- La Macération. 24
I-3-1-2- La Décoction 24I-3- 2- Les méthodes classiques d’extraction des HE 24
a) Hydro distillation .25
b) La distillation a la vapeur saturé 25
c) L’Hydro diffusion 25
d) L’expression au solvant volatil .25
e) L’expression à froid 26
f) L’enfleurage 26
I-3- 3- Les nouvelles méthodes d’extraction des HE .27
a) L’extraction au CO2 supercritique 27
b) La distillation fractionnée 27
c) Extraction assistée par micro-onde .27
Chapitre IV:
L’Analyse phytochimique des extraits végétaux
I-4-1- Le Screening phytochimique 28
I-4-2- Quelques méthodes de dosage 29
a- Dosage des phénols totaux 29
b- Dosage des flavonoïdes .30
c- Dosage des tanins .30
I-4-3- Le profil spectrophotométrique 31
Deuxieme Partie: Partie Experimentale
Chapitre I:
Matériel et méthodes
2-1- Le matériel végétal utilisé: .33
A. Le thym (Thymus vulgaris) 33a) Description botanique 33
b) Classification : 33
c) Distribution géographique : 33
d) Propriétés du thym : 33
B. Le grenadier (Punica granatum) 34
a) Description botanique : .34
b) Classification : Classification botanique du grenadier (Spichiger et al., 2009 ) .35
c) Distribution géographique : 35
d) Propriétés du grenadier: 35
C. L’Ortie dioïque, (Urtica dioica) 37
a) Description botanique 37
b) Classification .37
c) Distribution géographique 37
d) Propriétés de L’ortie dioïque 37
2-2- Extraction des extraits végétaux 39
2-2- 1- Extraction de l’huile essentielle du Thym (Thymus vulgaris) Par hydrodistillation .39
2-2-2- Extraction des extraits végétaux des feuilles d’Ortie (Urtica dioica) 40
2-2-3- Extraction des extraits végétaux de l’Ecorce de Grenade (Punica granatum) 42
2-3- Le Matériel microbiologique 43
2-4- Le Matériel de laboratoire (Les Réactifs) 44
2-5- Etude des activités biologiques (Test d’efficacité des extraits végétaux) 45
2-5- 1- Evaluation de l’activité antibactérienne des extraits: .46
a) Repiquage des espèces bactériennes : 46
b) Préparation de l’inoculum et des disques: 46
c) Préparation des milieux de culture et des extraits à tester : 46
d) Détermination de la Concentration Minimale Inhibitrice (CMI)
2-5- 2- Test in vitro de l’activité antifongique : .49
a) Préparation des milieux de culture: .49
b) Ensemencement et Préparation des disques 50
2-6- Etude de l’activité antioxydante : le Test de DPPH 52
2-7- L’analyse phytochimique des extraits végétaux 58
2-7- 1. Le Screening phytochimique 58
a) Dosage des phénols totaux 53
b) Dosage des flavonoïdes 53
c) Dosage des tanins 54
2-7- 2. Le profil spectrophtométrique .55
2-7-2-1- Utilisation du HPLC (Chromatographie liquide à haute performance) couplé à un
spectromètre de Masse .55
a) le principe: 56
b) L’analyse: .56
c) Identification des composés chimiques .56
2-7-2-2- Utilisation du FTIR (de l’anglais Fourier Transform InfraRed spectroscopy) .57
2-8- Analyses statistiques 57
Troisieme Partie: Resultats Et Discussions
3-1- Interprétations des résultats 58
3-1-1- Rendements des extractions 58
3-1-2- Interprétations des Résultats de l’effet fongicide des extraits végétaux testés .59
a) L’effet fongicide des extraits d’Ortie 59
b) L’effet fongicide des extraits de l’écorce de Grenade 60
c) L’effet fongicide de l’huile essentielle du Thym 61
3-1-3- Interprétations des Résultats de l’effet bactéricide des extraits végétaux testés 63a) L’effet bactéricide des extraits d’Ortie 63
b) L’effet bactéricide des extraits de grenade .65
c) L’effet bactéricide de l’huile essentielle du Thym 67
d) Résultats des tests d’antibiogramme comparatif avec antibiotiques de synthèse 69
3-1- 4- Activité antioxydante 71
3-1-5- Interprétations des résultats de l’Analyse phytochimique par FTIR 74
a) Analyse phytochimique des extraits de l’Ortie 74
b) Analyse phytochimique des extraits de l’écorce de Grenade .77
c) Analyse phytochimique de l’huile essentielle du Thym .78
3-1-6- Interprétations de l’Analyse phytochimique 79
3-1- 7- Discussion 82
Conclusion générale 91
Perspectives 94
Références bibliographiques
Annexes
I-1- Facteurs d’altération
I-1-1- Maladies parasitaires et ravageurs (facteurs biotiques)
I-1-2- Agents phytopathogènes (microbiologiques)
a- Les bactéries phytopathogènes
b- Les champignons phytopathogènes
1-1-3- Agents biologiques: Les ravageurs sont des animaux
a) Les vertébrés:
b) Les arthropodes:
1-1-4- Méthodes de lutte <
Chapitre II: Généralités sur la phytothérapie et le métabolisme secondaire des plantes
I- 2 -1- Le pouvoir des plantes
I-2-2- Domaines d’application des plantes médicinales
I-2-2- Définition de la phytothérapie 14
I-2-3- Intérêts des métabolites secondaires des plantes thérapeutiques .14
I-2-4- Nature chimique des métabolites secondaires des plantes thérapeutiques .14
I-2-4-1- Les composés phénoliques : 14
a- Rôles pour la plante 14
b- Utilisations par l’Homme 14
I-2-4-2- Les alcaloïdes 16
a- Rôles pour la plante 16
b- Utilisations par l’Homme: 16
I-2-4-3- Les terpénoïdes: .16
a- Rôles pour la plante 16
b- Utilisations par l’Homme: 16
I-2-5- Les huiles essentielles 17
– Description 18
– Répartition systématique et caractères chimiques 18
I-2-6- L’activité antioxydante 19
I-2-6-1- Les antioxydants 19
a) Les antioxydants primaires 20
b) Les antioxydants secondaires 21
I-2-6-2- Balance Oxydants /Antioxydants et stress oxydant .22
I-2-6-3- Méthode d’analyse de l’Activité antioxydante des extraits végétaux 22
Chapitre III :
Méthodes d’extraction des extraits végétaux
I-3-1- Méthodes d’extraction des extraits végétaux 24
I-3-1-1- La Macération. 24
I-3-1-2- La Décoction 24I-3- 2- Les méthodes classiques d’extraction des HE 24
a) Hydro distillation .25
b) La distillation a la vapeur saturé 25
c) L’Hydro diffusion 25
d) L’expression au solvant volatil .25
e) L’expression à froid 26
f) L’enfleurage 26
I-3- 3- Les nouvelles méthodes d’extraction des HE .27
a) L’extraction au CO2 supercritique 27
b) La distillation fractionnée 27
c) Extraction assistée par micro-onde .27
Chapitre IV:
L’Analyse phytochimique des extraits végétaux
I-4-1- Le Screening phytochimique 28
I-4-2- Quelques méthodes de dosage 29
a- Dosage des phénols totaux 29
b- Dosage des flavonoïdes .30
c- Dosage des tanins .30
I-4-3- Le profil spectrophotométrique 31
Deuxieme Partie: Partie Experimentale
Chapitre I:
Matériel et méthodes
2-1- Le matériel végétal utilisé: .33
A. Le thym (Thymus vulgaris) 33a) Description botanique 33
b) Classification : 33
c) Distribution géographique : 33
d) Propriétés du thym : 33
B. Le grenadier (Punica granatum) 34
a) Description botanique : .34
b) Classification : Classification botanique du grenadier (Spichiger et al., 2009 ) .35
c) Distribution géographique : 35
d) Propriétés du grenadier: 35
C. L’Ortie dioïque, (Urtica dioica) 37
a) Description botanique 37
b) Classification .37
c) Distribution géographique 37
d) Propriétés de L’ortie dioïque 37
2-2- Extraction des extraits végétaux 39
2-2- 1- Extraction de l’huile essentielle du Thym (Thymus vulgaris) Par hydrodistillation .39
2-2-2- Extraction des extraits végétaux des feuilles d’Ortie (Urtica dioica) 40
2-2-3- Extraction des extraits végétaux de l’Ecorce de Grenade (Punica granatum) 42
2-3- Le Matériel microbiologique 43
2-4- Le Matériel de laboratoire (Les Réactifs) 44
2-5- Etude des activités biologiques (Test d’efficacité des extraits végétaux) 45
2-5- 1- Evaluation de l’activité antibactérienne des extraits: .46
a) Repiquage des espèces bactériennes : 46
b) Préparation de l’inoculum et des disques: 46
c) Préparation des milieux de culture et des extraits à tester : 46
d) Détermination de la Concentration Minimale Inhibitrice (CMI)
2-5- 2- Test in vitro de l’activité antifongique : .49
a) Préparation des milieux de culture: .49
b) Ensemencement et Préparation des disques 50
2-6- Etude de l’activité antioxydante : le Test de DPPH 52
2-7- L’analyse phytochimique des extraits végétaux 58
2-7- 1. Le Screening phytochimique 58
a) Dosage des phénols totaux 53
b) Dosage des flavonoïdes 53
c) Dosage des tanins 54
2-7- 2. Le profil spectrophtométrique .55
2-7-2-1- Utilisation du HPLC (Chromatographie liquide à haute performance) couplé à un
spectromètre de Masse .55
a) le principe: 56
b) L’analyse: .56
c) Identification des composés chimiques .56
2-7-2-2- Utilisation du FTIR (de l’anglais Fourier Transform InfraRed spectroscopy) .57
2-8- Analyses statistiques 57
Troisieme Partie: Resultats Et Discussions
3-1- Interprétations des résultats 58
3-1-1- Rendements des extractions 58
3-1-2- Interprétations des Résultats de l’effet fongicide des extraits végétaux testés .59
a) L’effet fongicide des extraits d’Ortie 59
b) L’effet fongicide des extraits de l’écorce de Grenade 60
c) L’effet fongicide de l’huile essentielle du Thym 61
3-1-3- Interprétations des Résultats de l’effet bactéricide des extraits végétaux testés 63a) L’effet bactéricide des extraits d’Ortie 63
b) L’effet bactéricide des extraits de grenade .65
c) L’effet bactéricide de l’huile essentielle du Thym 67
d) Résultats des tests d’antibiogramme comparatif avec antibiotiques de synthèse 69
3-1- 4- Activité antioxydante 71
3-1-5- Interprétations des résultats de l’Analyse phytochimique par FTIR 74
a) Analyse phytochimique des extraits de l’Ortie 74
b) Analyse phytochimique des extraits de l’écorce de Grenade .77
c) Analyse phytochimique de l’huile essentielle du Thym .78
3-1-6- Interprétations de l’Analyse phytochimique 79
3-1- 7- Discussion 82
Conclusion générale 91
Perspectives 94
Références bibliographiques
Annexes
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