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MASTER

Titre

Essai de purification des protéines de lactosérum ovin sur résine échangeuses d’anions.

SPECIALITE

toxicologie industrielles et environnementales

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Essai de purification des protéines de lactosérum ovin sur résine échangeuses d'anions.


Sommaire:

Introduction
Chapitre I. Le lait ovin
I.1. Définition légale du lait.
I.2. Caractéristiques des laits de brebis et leurs facteurs de variation 06
1.2.1. Paramètres physico-chimiques 06
1.2.1.1. pH et acidité 06
I.2.1.2. Point de congélation
I.2.1.3. Densité.
I.2.1.4. Composition chimique 07
1.2.1.4.1. Lactose 08
1.2.1.4.2 Matières azotées 09
1.2.1.4.3. L’azote non protéique 09
1.2.1.4.4. L’azote protéique .09
1.2.1.4.5. Caséine 10
1.2.1.4.5.1. Aspects quantitatifs .10
1.2.1.4.6.Protéines solubles .11
1.2.1.4.7. Matière grasse 11
1.2.1.4.7.1. Composition et variabilité 11
1.2.1.4.7.2. Les globules gras 12
I.2.1.4.7.3.Profil en acides gras .13
I.2.1.4.8. Matières minérales .13
I.2.2. Facteur de variation de la composition du lait 14
Chapitre II. Le lactosérum ovin 15
II.1. Définition du lactosérum
II.2. Différents types de lactosérum 16
II.2.1.Lactosérum acide. .17
II.2.2. Lactosérum doux 17
II.3. Composition biochimique du lactosérum 18
II.3.1. Composition en protéines 19
II.3.2.Composition en lactose 20
II.3.3.Composition en sels minéraux et vitamines 20
II.4. Utilisation de lactosérum et de ses dérivés 22
Chapitre III. Les protéases 23
III.1. Définition 24
III.2. Sources 24
III.2.1. Protéases animales 24
III.2.2. Protéases végétales 24
III.2.3. Les protéases microbiennes 24
III.2.3.1. Protéases bactériennes 25
III.2.3.2. Protéases fongiques 25
III.2.4. Protéases virales 25
III.3. Classification et nomenclature 25
III.3.1. Exopeptidases 26
III.3.1.1. Aminopeptidases 26
III.3.1.2. Carboxypeptidases 26
III.3.2. Endopeptidases 27
III.3.2.1. Protéases à sérine 27
III.3.2.2. Protéases à acide aspartique 27
III.3.2.3. Protéases à cystéine 27
III.3.2.4. Protéases métallique 27
III.4. Applications 27
III.4.1. Industrie alimentaire 28
III.4.1.1. Industrie laitière 28
III.4.1.2. Industrie boulangère 28
III.4.1.3. Fabrication de produits à base de soja 29
III.4.2. Autres industries 29
III.4.2.1. Production des détergents 29
III.4.2.2. Gestion des déchets 29
III.4.2.3. Médicaments et produits pharmaceutiques 30
III.4.2.4. Recherche scientifique 30
Matériels et méthodes 32
I. Préparation du lactosérum 32
II. Dosage des protéines par la méthode du Biuret 32
II.1.Principe 32
II.2. Protocol 32
III. Concentration de l’extrait par l’acétone 33
IV. Chromatographie sur colonne DEAE sépharose pH 6.4 33
V. SDS-PAGE 33
V. Principe 33
V.1.Protocol 34
VI. Protéolyse 34
VI.1. Principe 34
VI.2. Protocol 35
VII. Détermination de pouvoir antioxydant par DPPH 35
VII.1. Principe 35
VII.2. Protocol 36
1. Préparation de lactosérum 38
Résultats et discussion 40
2. Résultat de chromatographie sur colonne DEAE sepharose 40
3. Résultats de SDS-PAGE 41
4. Activité antioxydant 43
4.1. Test de piégeage du radical libre DPPH 43
Conclusion 51
Références bibliographiques 53

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