Contribution à l’étude de l’activité catalytique de l’enzyme peroxydase extraite du Navet rose (Brassica rapa)
Des informations générales:
Le niveau |
Master |
Titre |
Contribution à l’étude de l’activité catalytique de l’enzyme peroxydase extraite du Navet rose (Brassica rapa) |
SPECIALITE |
Biochimie appliquée |
Page de garde:
Sommaire:
Introduction générale
Synthèse bibliographique
1. Navet rose :
1.1. Description de la plante
1.2. Classification botanique.
1.3. Composition chimique.
1.4. Intérêt
2. Peroxydase.
2.1. Définition
2.2. Structure.
2.3. Site actif.
2.4. Mécanisme d’action
2.6. Application biotechnologique des peroxydases
Matériel et méthodes
1. Extraction de la peroxydase
1.1. Préparation de l’extrait brut
2. Dosage des protéines
2.1. Principe
2.2. Préparation de la gamme d’étalonnage.
2.3. Détermination de la concentration en protéines des préparations enzymatiques
3. Purification de la peroxydase
3.1. Précipitation au sulfate d’ammonium
3.1.1. Principe
3.1.2. Mode opératoire
3.2. Dialyse
3.2.1. Principe
3.2.2. Mode opératoire
4. Détermination des activités volumiques et spécifiques des extraits enzymatiques
4.1. Milieu réactionnelle de l’activité enzymatique
4.2. Etude de la cinétique de la peroxydase
4.2.1. Détermination de la vitesse initiale
4.2.2. Détermination des paramètres cinétiques a.La vitesse maximale Vmax b. La constante de Michaelis Km
4.2.3. Détermination des activités volumique totales et spécifiques
a. Détermination des activités volumiques b. Activité enzymatique totale c. Activité enzymatique spécifique
5. Détermination du rendement et de l’enrichissement.
5.1. Rendement de purification
5.2. Taux de purification (Enrichissement).
Résultats et discussion
1. Dosage des protéines dans l’extrait brut
2. Mesure des activités volumique totales et spécifiques de la peroxydase dans l’extrait brut
3.1. Détermination des vitesses initiales
3.2. Détermination des paramètres cinétiques Vmax et Km
3.3. Mesure de l’activité volumique totale et spécifique de l’extrait brut de la peroxydase
3. Mesure des activités volumique totales et spécifiques de la peroxydase après purification
3.1. Précipitation différentielle par le sulfate d’ammonium avant dialyse. 3.2. Précipitation différentielle par le sulfate d’ammonium après dialyse.
Conclusion.
Références bibliographiques.
Annexe
Synthèse bibliographique
1. Navet rose :
1.1. Description de la plante
1.2. Classification botanique.
1.3. Composition chimique.
1.4. Intérêt
2. Peroxydase.
2.1. Définition
2.2. Structure.
2.3. Site actif.
2.4. Mécanisme d’action
2.6. Application biotechnologique des peroxydases
Matériel et méthodes
1. Extraction de la peroxydase
1.1. Préparation de l’extrait brut
2. Dosage des protéines
2.1. Principe
2.2. Préparation de la gamme d’étalonnage.
2.3. Détermination de la concentration en protéines des préparations enzymatiques
3. Purification de la peroxydase
3.1. Précipitation au sulfate d’ammonium
3.1.1. Principe
3.1.2. Mode opératoire
3.2. Dialyse
3.2.1. Principe
3.2.2. Mode opératoire
4. Détermination des activités volumiques et spécifiques des extraits enzymatiques
4.1. Milieu réactionnelle de l’activité enzymatique
4.2. Etude de la cinétique de la peroxydase
4.2.1. Détermination de la vitesse initiale
4.2.2. Détermination des paramètres cinétiques a.La vitesse maximale Vmax b. La constante de Michaelis Km
4.2.3. Détermination des activités volumique totales et spécifiques
a. Détermination des activités volumiques b. Activité enzymatique totale c. Activité enzymatique spécifique
5. Détermination du rendement et de l’enrichissement.
5.1. Rendement de purification
5.2. Taux de purification (Enrichissement).
Résultats et discussion
1. Dosage des protéines dans l’extrait brut
2. Mesure des activités volumique totales et spécifiques de la peroxydase dans l’extrait brut
3.1. Détermination des vitesses initiales
3.2. Détermination des paramètres cinétiques Vmax et Km
3.3. Mesure de l’activité volumique totale et spécifique de l’extrait brut de la peroxydase
3. Mesure des activités volumique totales et spécifiques de la peroxydase après purification
3.1. Précipitation différentielle par le sulfate d’ammonium avant dialyse. 3.2. Précipitation différentielle par le sulfate d’ammonium après dialyse.
Conclusion.
Références bibliographiques.
Annexe
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