Contribution à l’étude de l’activité catalytique d’enzymes extraits à partir de végétal
Des informations générales:
Master |
Le niveau |
Contribution à l’étude de l’activité catalytique d’enzymes extraits à partir de végétal |
Titre |
| Biochimie Appliquée |
SPECIALITE |
Page de garde:
Sommaire:
Remerciments
Table de matières :
INTRODUCTION GÉNÉRALE
Synthèse bibliographique
1. La Peroxydase
1.1. Historique
1.2. Définition
1.3. Nomenclature.
1.4. Sources.
1.5. Classification.
1.6. Structure.
1.7. Site actif.
1.8. Spécificité du substrat.
1.9. Mécanisme d’action
1.10. Rôles
1.11. Localisation
1.12. Utilisations.
2. Techniques d’extraction et de purification des enzymes.
2.1. Extraction.
2.2. Purification
2.2.1 Précipitation par sels.
2.2.2. Dialyse
2.2.3. Chromatographie.
Radis rose
3.2. Description.
3.3. Classification botanique
3.4. Intérêt
Matériel et méthodes
1- Détermination du coefficient d’absorbance molaire «< & » du gaïacol
1.1- Balayage spectrale.
1.2- Détermination du coefficient d’absorption molaire «< ɛ » du gaïacoquinone
2- Dosage des protéines.
3- Extraction de la peroxydase.
4- Purification de la peroxydase
4.1- Précipitation au sulfate d’ammonium
4.2- Purification par dialyse
4.3- Purification par chromatographie d’adsorption
5- Détermination des activités volumiques et spécifiques des extraits enzymatiques
5.1- Etude cinétique de la peroxydase
5.2- Détermination des activités volumiques totales et spécifiques
6-
Détermination du rendement et de l’enrichissement.
Résultats et discussion.
1. Détermination de la longueur d’onde”2″ et du coefficient d’absorbance
moleculaires du gaïacol.
1.1- Balayage spectrale
1.2- Détermination du coefficient d’absorption moléculaire « & » du gaïacoquinone
Dosage des protéines dans l’extrait brut
3. Mesure des activités volumiques totales et spécifiques de la peroxydase
dans l’extrait brut
3.1- Détermination des vitesses initiales.
3.2- Détermination des paramètres cinétiques Vmax et Km.
3.3- Mesure de l’activité volumique totale et spécifique de l’extrait brut de la peroxydase
4. Mesure des activités volumiques totales et spécifiques de la peroxydase après purification
4.1- Précipitation différentielle par le sulfate d’ammonium avant dialyse
4.2- Précipitation différentielle par le sulfate d’ammonium après dialyse
4.3- Chromatographie sur colonne
Conclusion.
Références bibliographiques
Annexe.
Table de matières :
INTRODUCTION GÉNÉRALE
Synthèse bibliographique
1. La Peroxydase
1.1. Historique
1.2. Définition
1.3. Nomenclature.
1.4. Sources.
1.5. Classification.
1.6. Structure.
1.7. Site actif.
1.8. Spécificité du substrat.
1.9. Mécanisme d’action
1.10. Rôles
1.11. Localisation
1.12. Utilisations.
2. Techniques d’extraction et de purification des enzymes.
2.1. Extraction.
2.2. Purification
2.2.1 Précipitation par sels.
2.2.2. Dialyse
2.2.3. Chromatographie.
Radis rose
3.2. Description.
3.3. Classification botanique
3.4. Intérêt
Matériel et méthodes
1- Détermination du coefficient d’absorbance molaire «< & » du gaïacol
1.1- Balayage spectrale.
1.2- Détermination du coefficient d’absorption molaire «< ɛ » du gaïacoquinone
2- Dosage des protéines.
3- Extraction de la peroxydase.
4- Purification de la peroxydase
4.1- Précipitation au sulfate d’ammonium
4.2- Purification par dialyse
4.3- Purification par chromatographie d’adsorption
5- Détermination des activités volumiques et spécifiques des extraits enzymatiques
5.1- Etude cinétique de la peroxydase
5.2- Détermination des activités volumiques totales et spécifiques
6-
Détermination du rendement et de l’enrichissement.
Résultats et discussion.
1. Détermination de la longueur d’onde”2″ et du coefficient d’absorbance
moleculaires du gaïacol.
1.1- Balayage spectrale
1.2- Détermination du coefficient d’absorption moléculaire « & » du gaïacoquinone
Dosage des protéines dans l’extrait brut
3. Mesure des activités volumiques totales et spécifiques de la peroxydase
dans l’extrait brut
3.1- Détermination des vitesses initiales.
3.2- Détermination des paramètres cinétiques Vmax et Km.
3.3- Mesure de l’activité volumique totale et spécifique de l’extrait brut de la peroxydase
4. Mesure des activités volumiques totales et spécifiques de la peroxydase après purification
4.1- Précipitation différentielle par le sulfate d’ammonium avant dialyse
4.2- Précipitation différentielle par le sulfate d’ammonium après dialyse
4.3- Chromatographie sur colonne
Conclusion.
Références bibliographiques
Annexe.
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